生物能源工作总结
生物能源工作总结 本文关键词：工作总结，能源，生物
生物能源工作总结 本文简介：生物能源工作总结本人于2009年1月初有幸担当生物能源项目主要研发人员，从参与生物能源专利的编写、修改、定稿和生物能源相关实验，在2010年4月末暂停此计划后，该项目共经过了16个月的时间，期间由于其他工作占据了一定的时间，致使该项目进行的时间较长。在此将此项目到目前为止所进行的阶段及工作做个总结。
生物能源工作总结 本文内容：
生物能源工作总结
本人于2009年1月初有幸担当生物能源项目主要研发人员，从参与生物能源专利的编写、修改、定稿和生物能源相关实验，在2010年4月末暂停此计划后，该项目共经过了16个月的时间，期间由于其他工作占据了一定的时间，致使该项目进行的时间较长。
在此将此项目到目前为止所进行的阶段及工作做个总结。
实验一：藻种培养。
目的：为基因提供宿体
买回的小球藻藻种，以1/10的LB液体培养基，按1:10体积比扩种于
100
mL
的三角烧瓶中，在恒温光照培养箱中培养，待藻体达到一定密度后待用。
结果：小球藻扩增到近10L的量。
实验二：ADH-PUC、PDC-PUC、FAEES-PUC质粒转化到大肠杆菌中扩增
目的：所用质粒来源为黄教授提供，量较少，需大量扩增以备后续实验。
1、
制大肠杆菌感受态细胞：
（一）、
受体菌的培养
从LB平板上挑取新活化的E.
coli
DH5α单菌落,接种于3-5ml
LB液体培养基中，37℃下振荡培养12小时左右,直至对数生长后期。将该菌悬液以1:100-1:50的比例接种于100ml
LB液体培养基中，37℃振荡培养2-3小时至OD600
＝0.5左右。
（二）、
感受态细胞的制备
(
CaCl2
法)
1）、将培养液转入离心管中,冰上放置10分钟,然后于4℃下3000g离心10分钟。
2）、
弃去上清,用预冷的0.05mol/L的CaCl2
溶液10ml轻轻悬浮细胞,冰上放置15-30分钟后,4℃下3000g离心10分钟。
3）、弃去上清,加入4ml预冷含15%甘油的0.05mol/L的CaCl2
溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置几分钟,即成感受态细胞悬液。
4）、
感受态细胞分装成200μl的小份,贮存于-70℃可保存半年。
2、
转化，筛选：
1）、从-70℃冰箱中取200μl感受态细胞悬液,室温下使其解冻,解冻后立即置冰上。
2）、
加入puc质粒DNA溶液(含量不超过50ng,体积不超过10μl),轻轻摇匀,冰上放置30分钟后。
3）、42℃水浴中热击90秒,热击后迅速置于冰上冷却3-5分钟。
4）、向管中加入1ml
LB液体培养基,混匀后37℃振荡培养1小时,使细菌恢复正常生长状态.
5）、将上述菌液摇匀后取100μl
涂布于含Amp的筛选平板上，正面向上放置半小时，待菌液完全被培养基吸收后倒置培养皿，37℃培养16-24小时。
同时做两个对照:
对照组1:
以同体积的无菌双蒸水代替DNA溶液,其它操作与上面相同。此组正常情况下在含抗生素的LB平板上应没有菌落出现。
对照组2:
以同体积的无菌双蒸水代替DNA溶液，但涂板时只取5μl
菌液涂布于不含抗生素的LB平板上，此组正常情况下应产生大量菌落。
结果：通过筛选得到了三种基因转化后的大肠杆菌
实施例三：提取大肠杆菌中扩增的质粒
目的：质粒存在于大肠杆菌中，需提取纯化，以备后续实验。
1、
挑取单菌落过夜培养活化：在含有抗生素的LB
液体培养基中接种一单菌落，37℃150rpm摇培过夜。
2、
碱法提质粒：
所需溶液与仪器：
1）溶液I：50mmol/L
葡萄糖、25mmol/L
Tris-HCl
(pH8.0)、10mmol/L
EDTA(pH8.0)，高压灭菌15min，4oC储存；
2）溶液II：用时现配,0.4N
NaOH、2%SDS等体积混合；
3）溶液III：5M
KAc
60ml、冰乙酸
11.5ml
、ddH2O
28.5ml。
4）恒温摇床，台式离心机，制冰机，电泳装置，紫外透射观测仪。
步骤：
1).
取1.5mL菌液于小离心管中，室温12
000rpm离心1min收集菌体，弃去上清。加入100μl冰预冷的溶液I，剧烈振荡直至悬液发稠。
2).
加入200μl新配制的溶液II，温和颠倒5次，置冰上1-2
min。
3).
加入150μl冰预冷的溶液III，温和振荡10s，置冰上5min。
4).
12
000rpm，离心10min,转上清于另一管中，用等体积的酚/氯仿抽提一次，10
000rpm离心2min，吸上清于另一管中。加入2倍体积100％乙醇，－20℃沉淀1hr。
5).
12
000rpm，离心10min回收质粒DNA，用75%乙醇洗一次，超净台中吹干沉淀后溶于适量灭菌重蒸水中。琼脂糖凝胶电泳检测质粒的质量。
3、
电泳检测：
1）.
制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7
g(0.5
g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70
ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液.
2）.
胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻璃板.取透明胶带将玻璃板与内槽两端边缘封好,形成模子.将内槽置于水平位置,并在固定位置放好梳子.加入显色剂溴化乙锭50ul（剧毒，需带手套及口罩）,混匀，将冷却到65℃左右的琼脂糖凝胶液混匀小心地倒入内槽玻璃板上,使胶液缓慢展开,直到整个玻璃板表面形成均匀胶层.室温下静置直至凝胶完全凝固,垂直轻拔梳子,取下胶带,将凝胶及内槽放入电泳槽中.添加
1×TAE电泳缓冲液至没过胶板为止.
3）.
加样:在点样板上混合DNA样品和上样缓冲液,上样缓冲液的最终稀释倍数应不小于1X.用10
ul微量移液器分别将样品加入胶板的样品小槽内,每加完一个样品,应更换一个加样头,以防污染,加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面.(注意:加样前要先记下加样的顺序).
4）.
电泳:加样后的凝胶板立即通电进行电泳,电压60-100V,样品由负极(黑色)向正极(红色)方向移动.电压升高,琼脂糖凝胶的有效分离范围降低.当溴酚蓝移动到距离胶板下沿约1cm处时,停止电泳.
5)观察照相:取出凝胶，在紫外灯下观察,DNA存在则显示出红色荧光条带,采用凝胶成像系统拍照保存
结果：通过电泳检测，得到了所需的三种带目的基因的质粒
实施例四：酶切质粒得到目的基因
目的：该质粒为天然提取所得，需将该质粒上的目的基因酶切下来，以备后续实验。
酶切，连接表达载体。
酶切体系：
质粒DNA
内切酶缓冲剂
Xho内切酶
Xba内切酶
无菌水
电泳检测：同实验三电泳检测步骤，
回收纯化：以北京优博奥生物科技有限公司所生产的DNA凝胶回收试剂盒为例
1）．
在紫外灯下割下含DNA的琼脂糖胶块(TAE
或TBE凝胶)，使它尽可能的小，放入1.5ml
离心管中。大体积的凝胶块需要切成小块，以缩短凝胶融化的时间。
2）．
根据凝胶浓度，按下表所提供的参数加GS
Buffer:
凝胶浓度
GS
Buffer体积
<1.0%
3倍凝胶体积
<1.5%
4倍凝胶体积
<2.0%
5倍凝胶体积
如1.5％的琼脂糖凝胶重量为100mg，则应该加入400ul
GS
Buffer。
3）．
悬浮均匀后置65℃水浴，每3分钟颠倒混匀一次，直至琼脂糖胶块完全溶化（约10mins）。
按照GS
Buffer体积的50％加入PH
Buffer，充分混合均匀。将混合液转入到离心吸附柱，并将离心吸附柱置于废液收集管中，10,000rpm离心30s，去废液。
4）.
将离心吸附柱置回废液收集管中，加入500ul
W2（加入乙醇否？）于离心吸附柱中，10,000rpm
离心30s,弃滤液。以同样的方法再用500ul
W2溶液洗涤一次；
5）.
将离心吸附柱置回废液收集管中，最高速度离心1min，以弃净W2。
6）.
小心取出离心吸附柱，将其套入一个无菌的1.5ml
离心管中，在吸附膜中央加入30ul
EB（Eluent
Buffer）,室温静置2-5min后，最高速度离心1min。
7）.
取出离心吸附柱，将1.5ml
离心管（DNA溶液）置于-20℃保存备用。
结果：通过电泳检测并回收纯化，得到了酶切完全的三种目的基因
实验五：酶联目的基因与载体质粒PKY
目的：基因与载体质粒连接后，可较稳固的转化到宿主中，并有效表达。
连接体系：
用Xho和Xba酶处理过的表达载体pKY171
Xho和Xba内切获得的目的基因片段
连接缓冲剂
无菌水
电泳检测：同实验三电泳检测步骤
回收纯化：同实验四回收纯化步骤
结果：通过电泳检测并回收纯化，得到了带三种目的基因的重组质粒
实验六：重组质粒转化大肠杆菌中扩增：
目的：酶连后的质粒量较少，需扩增，以备后续实验。
1、
制备大肠杆菌感受态细胞：同实验二制备大肠杆菌感受态细胞方法。
2、
转化，筛选：同实验二转化，筛选步骤。
结果：通过筛选，得到了三种重组质粒转化后的大肠杆菌
实验七：提取重组质粒并回收纯化
目的：重组质粒存在于大肠杆菌中，需提取纯化，以备后续实验
1、
提取质粒：同实验三质粒提取方法。
2、
电泳检测：同实验三电泳检测步骤
3、
回收纯化：同实验四回收纯化步骤
结果：通过电泳检测并回收纯化，得到了三种重组质粒。
实验八：纯化后的质粒转化到农杆菌中
目的：农杆菌用于侵蚀藻类，故需将质粒转化到农杆菌中，由于质粒转化到农杆菌中较困难，故先前重组的质粒只能在大肠杆菌中扩增后，再提取转化到农杆菌中。
1、
制备农杆菌感受态细胞：
实验仪器、材料和试剂
仪器：超净工作台，恒温摇床，冷冻高速离心机，高压灭菌锅，冰箱，70℃超低温冰柜，分光光度计，接种针，10ml
试管，50ml
离心管，1.5ml
离心管，冰浴，微量进样器及吸头。以上玻璃仪器和离心管需在用前灭菌，灭菌条件：120℃，15分钟。
材料：土壤农杆菌LBA4404菌株或其它农杆菌菌株
试剂：
YEB液体培养基（1L）：酵母提取物1g，牛肉膏5g，蛋白胨5g，蔗糖5g，
MgSO4.7H2O
0.5g,pH7.0，高压灭菌；
链霉素（Sm）储液：125mg/ml
0.15
N
NaCl，高压灭菌。
20mM
CaCl2，高压灭菌。
实验步骤
1）.
挑取根癌农杆菌LBA4404
单菌落于3ml
的YEB液体培养基（
含Sm
125mg/l）中，28°C振荡培养过夜；
2）.
取过夜培养菌液0.5ml接种于50mlYEB(Sm
125mg/l)液体培养基中，28°C振荡培养至OD600为0.5；
3）.
5000rpm,离心5min；
4）.
加入10ml
0.15N
NaCl，使农杆菌细胞充分悬浮，5000rpm,离心5min；
5）.
弃上清，置于冰上，加入1ml预冷的20mM
CaCl2，充分悬浮细胞，冰浴中保存，24小时内使用，或分装成每管200ml，液氮中速冻1
分钟，置70°C保存备用。
2、
转化，筛选：同实验二转化，筛选步骤
结果：通过筛选，得到了三种重组质粒转化后的农杆菌
实验九：农杆菌多次侵蚀藻类：
目的：利用农杆菌的侵蚀能力，进行侵蚀藻类。
藻类预培养（1-5天），农杆菌侵染（数秒钟），共培养（2-3天）筛选（培养基中加入抑菌抗生素和选择抗生素），抗性藻类的获得。
结果：将含ADH-PKY农杆菌、含PDC-PKY农杆菌依次与小球藻共培养。通过筛选得到抗性小球藻。
实验十：培养藻类
目的：扩增藻类，以便检查目的基因是否表达，得到目的产物。
以1/10的LB液体培养基，按10：1比例，恒温光照，培养小球藻
结果：
小球藻培养到500ml
本项目目前已完成到生物能源各项专利的填写与申报，实验阶段做到了三种基因转化后的农杆菌与小球藻共培养阶段。
由于工作调动，暂停该项目。
未完成的实验有：
实验十一：转基因藻类的检测。
目的：基因转化到藻类中，
需通过高科技方法检测基因是否在藻类中有效稳定的表达。
实验十二：设定藻类中目的产物的获取工艺
目的：藻类中基因表达的产物需通过有效的提取工艺来获得，以便降低成本。
篇2：小学教学工作年终工作总结
小学教学工作年终工作总结 本文关键词：教学工作，工作总结，年终，小学
小学教学工作年终工作总结 本文简介：小学教学工作年终工作总结时间如流水，一去不复返，转眼间，我们又要送走2010年，迎来2010年。即将过去的2010年，留给我很多快乐，更留给我很多收获。现将一年的工作情况总结如下。思想情况：新的一年开始了，我送给自己一句话激励自己：生命就是一个赛程，每人每天都在跨越障碍，相信自己，会做好的。我要求自
小学教学工作年终工作总结 本文内容：
小学教学工作年终工作总结
时间如流水，一去不复返，转眼间，我们又要送走2010年，迎来2010年。即将过去的2010年，留给我很多快乐，更留给我很多收获。现将一年的工作情况总结如下。
思想情况：
新的一年开始了，我送给自己一句话激励自己：生命就是一个赛程，每人每天都在跨越障碍，相信自己，会做好的。我要求自己，每天尽可能抽出一些时间进行政治业务学习，充实自己，丰富自己，提升自己。
工作情况：
这是我到进修学校工作的第二个年头，所以我丝毫不敢懈怠，工作仍然是认认真真、勤勤恳恳。一年里，利用两个假期充分研读了一、二、三三个年级的数学教材，又阅读了一些教学参考资料，然后对全县一、二、三年级的数学教师进行了两次教材培训，交流研讨了教学过程中遇到的一些问题，收到了比较好的效果。在每学期开学初都认真制定了一、二、三三个年级的教学进度表，为各学校做好学期初各种服务工作。
三月份，我们进行了常规教学听课活动，先后去了实验小学、长青小学、圣水中心校、前进小学、胜利小学、建设小学。每到一所学校，我都非常认真地听课，课后同任课教师虚心地交流沟通，很好地提高了自己的业务水平。
四月份，我们仍然先是深入到各学校听常规教学课。我们先后去了时家店中心校、驼腰岭中心校、五道沟中心校，通过听课，我们既了解了每个学校的教学情况，同时为我们怎样进一步开展教学教研活动明确了方向。15日，我们去三源浦中心校、红石中心校听课，联系确定在三源浦召开数学片教研会有关事宜。24日，我们又去三源浦中心校统一听教研课试讲。由于我们准备工作做得充分，29日在三源浦召开的数学有效教学片教研会开得非常成功。教研会上，一共展示了五节数学课，下午课后，我们先是进行了教师和教研员的互动研讨，提问答疑，然后，我对两节低年级数学课进行了点评，最后，梁老师做了精彩的点评和数学课堂教学讲座。
五月份，8日，和语文教研员张老师上午去建设小学，下午去胜利小学听了两节语文课，收获非常大。14日，积极参加了全县的语文教学研讨会，做吹哨工作，忙活了一天，虽然累了一点，但是看到语文教研会圆满成功，心里还是充满了喜悦。15日、16日，梁老师出完了六年级数学模拟试题，我负责用电脑打出来，时间短，任务急，很辛苦，我用两天时间出色地完成了任务。27日，我们去亨通中心校听课；29日，我们去罗通山中心校听课。
六月份，我们开始筹备出期末考试题。由于学校经费紧张，我们下乡听课比以前少了。这学期出题时间比较宽裕，但是我们这一次出题一律要形成电子文本，难度增加了，好在我刚刚完成六年级数学模拟试题的打印任务，我认真对待，终于很好地完成了出题任务。
七月份，临近学期末了，我们在进行个人网页制作工作，我不太会，都是老同学左主任帮助我制作的，我十分感谢她。13日，我们小教部四位教研员前往长春听课学习，我们19日才从长春返回，此次学习，我的收获大极了。
九月份，教育局组织实验、长青部分教师开展送教下乡活动。我们首先到这两所学校确定人选，然后于17日去这两所学校听教师试讲，进行交流沟通。19日，我们一同去孤山子参加送教下乡活动。活动中，我们先听课，然后同孤山子全乡对应年段教师进行了课后评课研讨，受到了教师的好评。22日，我们小教部全体教师参加了英语教研员组织的全县英语教师空讲比赛活动，使此次活动圆满结束。25日，我们去前进小学听课，了解研究常规教学工作。
十月份，我们首先去建设小学、胜利小学进行了听课，了解研究常规教学工作。14日，我们去圣水、亨通、新发各小学听课，确定圣水片教研会讲课人选。15日我们去长青小学听课，参加了市教育学院到柳河对各个学科课程改革的调研工作。17日，我们又去圣水听教师试讲，研究讲课情况。22日，我们成功地在圣水召开了语文、数学实效教学片教研会。此次活动，共安排了5节课，下午课后，我们小教部全体教研员同与会的圣水、亨通、新发各乡的教师进行了互动研讨、问题答疑，研讨、答疑在轻松愉快和谐的氛围中进行，教研会收到了非常好的效果。
十一月份，我们重点配合师训部进行了对骨干教师进行听课评定工作。从本月13日到12月1日，我们历时近四周时间，从农村到城镇，走了22所小学，我共听了39位骨干教师的课，一方面很好地完成了听课评定工作，一方面也使我更好地了解了我县骨干教师的课堂教学情况。完成这项工作后，我们马上投入到学期末考试命题工作。我们抓紧一切时间，用了不到三周时间终于很好地完成了任务。
本学期，更值得我欣慰的是，我的数学教研博客在黄处长的帮助下终于开通了，并且发布到学校网上。目前，上网参与评论的教师还很少，（有的教师没有电脑，有的教师不知道必须先注册才能留言、评论）我会继续努力，多上传一些适合教师学习的，有利于教师专业成长的好内容，为更好地服务于一线教师做出我最大的贡献。
篇3：小学语文五年级上册教学工作总结
小学语文五年级上册教学工作总结 本文关键词：上册，工作总结，五年级，小学语文，教学
小学语文五年级上册教学工作总结 本文简介：小学语文五年级上册教学工作总结姚铭小学：普玉仙新的《语文课程标准》大力倡导“自主、合作、探究”的学习方法，这学期我在语文教学方面进行大胆探索，按照期初制订的教学计划，大力培养了学生良好的学习习惯，指导了学生学习“自主化”，激发了学生的学习兴趣，提高了学生的自学能力，发展了学生的智力，提高了学习效率。
小学语文五年级上册教学工作总结 本文内容：
小学语文五年级上册教学工作总结
姚铭小学：普玉仙
新的《语文课程标准》大力倡导“自主、合作、探究”的学习方法，这学期我在语文教学方面进行大胆探索，按照期初制订的教学计划，大力培养了学生良好的学习习惯，指导了学生学习“自主化”，激发了学生的学习兴趣，提高了学生的自学能力，发展了学生的智力，提高了学习效率。主要表现在：
1、学生从“苦学”到“乐学”
课堂上，我创设一种愉快的学习氛围，鼓励学生敢于质疑、发问，学会释疑、说理。在教学过程中，学生养成了良好的学习习惯，如：双手拿书、右手执笔、举左手、边读边批划，批划时不借助尺子等工具。
2、变“学会”为“会学”，培养了学生的语文实践活动的能力。
要让学生自主学习，应授之以渔，教给方法，逐步培养和提高学生自学能力。因此，学生在学习的过程中遇到的难题，大多能通过上网查找资料、查找工具书、有关书本、报刊、联系实际等手段来得以解决，化简驭繁，化难为易，事半功倍，大大提高了学生动手操作的能力。
3、学生的主体意识得到培养，不再是“老师讲，学生听；老师问，学生答。”的局面，学生是学习的主人，老师是导演，师生角色互换。
4、启发了学生的思维。
在教学过程中，学生是主角，是主人；教师是导师，是指导者。教师的作用是指导、引导、诱导和辅导。“教”完全是为了“学”，教师的“教”，要服从学生的“学”。没有学生自觉、主动的“学”，积极的实践，无论教师怎样教，学生都是很难完成教学任务的。在课堂教学中，把学习的主动权交给学生，能充分发挥教师的主导作用和学生的主体作用，让学生获得了更多的自学机会，开发了学生的自学潜能，学生自主学习的积极性高，自学能力强，师生、生生相互作用，课堂活跃而又有秩序，大大提高了教学效果。学生的思维活跃、分析课文、品词析句的欣赏能力、审美能力也大大提高了。
5、学生的自控能力得到培养，师生共振协调课堂教学。
6、学生的阅读能力及写作能力明显提高。
作文，是语文教学的核心内容之一。是学生表达能力的具体体现，是字、词、句、段、篇的综合训练。因此，阅读写作是学生的弱项，很多学生对此都大伤脑筋。通过一期的教学，学生的自学能力提高，也影响了他们的阅读活动。掌握了自学能力后，在教师的引导下，他们博览群书，并用自己学会的“读—想—批—划—品—析—评”的方法，通过细读、精读进行分析、阅读，从而达到对文章的理解。广泛地阅读大量的文章，大量的积累是写作的源泉。从古人的“读书破万卷，下笔如有神”，我们可以看出阅读和写作是一对孪生姐妹，阅读是理解，写作是运用，运用要在理解的基础上进行，写作也要以阅读为基础，读和写是紧密联系在一起的。“读”是基础。在读的基础上，学生自读、自思、自悟，不仅自己解决了疑难问题，还积累了大量的词汇，汲取了作者的各种写作方法，因此，下笔的时候也就“如有神”了。学生的写作能力普遍提高。在作文中还出现了“佳词妙句”，写作时也能够多角度地选材，有的甚至颇有新意。
一学期来，虽然取得了一些成绩，但也还存在很多不足。有的学生不爱学习，贪玩，对于基础知识掌握不牢；还有的学生害怕作文，作文水平老上不去.在今后的教学工作中，要发扬优点，弥补不足，争取学期末取得更好的成绩。