生物活性玻璃和五倍子对乳牙釉质早期龋治疗效果探究
王首力
摘 要：文章以乳牙作为研究对象，通过使用多乐氟、生物活性玻璃溶液、五倍子溶液及生物活性玻璃和五倍子结合溶液对乳牙釉质早期龋治疗进行处理;然后使用扫描电镜对不同组的样本进行观察，使用荧光显微镜对不同样本牙齿进行观察，使用生化分析仪对再脱矿处理中脱矿液的钙离子浓度进行测定。实验结果表明，生物活性玻璃和五倍子的结合溶液对乳牙釉质早期龋治疗效果最好。
关键词：生物活性玻璃;五倍子;乳牙
中图分类号：R781.1 文献标识码：A 文章编号：1001-5922（2021）06-0044-05
Abstract：This paper takes deciduous teeth as the research object， and treats the early caries of deciduous tooth enamel by using dole fluoride， bioactive glass solution， gallnut solution and bioactive glass and gallnut combined solution; then using scanning electron microscope to observe different groups of samples， a microhardness tester was used to measure different sample teeth， and a biochemical analyzer was used to measure the calcium ion concentration of the demineralization solution in the re-demineralization treatment. The experimental results show that the combined solution of bioactive glass and gallnut has the best effect on the treatment of early caries of enamel of deciduous teeth.
Key words：bioactive glass; gallnut; deciduous teeth
如今，低齡儿童喜欢喝碳酸饮料，提高了乳牙釉质龋病的发生概率。于是人类对乳牙龋病的重视程度不断提高，进行早期龋治疗将有利于治疗效果。生物活性玻璃是一种能够修复、再生和替代组织的材料，在牙科、骨科领域中具有广泛作用[1]。将生物活性玻璃材料应用到乳牙釉质早期龋治疗中，能够促进釉质再矿化[2]。五倍子属于一种中草药，该材料应用到龋齿治疗中能够阻碍牙本质龋的进展速度[3]。通过相关学者对五倍子的研究，五倍子具有抗菌作用，能够抑制脱矿、促进再矿化，能够抑制龋齿的发展等作用[4]。所以文章将对这两组材料及其结合体在乳牙釉质早期龋治疗中进行应用分析。
1 实验过程
1.1 实验材料和仪器
实验需要的主要材料为乳前牙，还需要人工唾液、五倍子、多乐氟、生物活性玻璃粉体、人工脱矿液（50 mmol/L冰醋酸、2.2 mmol/L磷酸二氢钾、2.2 mmol/L硝酸钙、PH=4.5）、去离子水、无水乙醇等。其中乳前牙的获取方式：将某医院一段时间内患者的滞留乳前牙进行保存，要求患者的年龄在5～8岁，进行实验的乳前牙需要具备一些要求，比如该牙齿没有裂纹、没有填充、没有进行牙髓治疗、没有磨损、没有色素沉着、牙釉质发育完全、形态正常等，经过选择之后，最后一共收集到了88颗符合要求的乳前牙。这些乳前牙用于实验之前，需要对其进行处理和保存，首先需要将其残余根部进行清除，只需要用到牙齿的牙冠部分。然后使用没有含氟的抛光膏对牙齿进行处理，并且还要将牙齿上的各种污渍、软组织进行清洗干净，最后将其放入生理盐水中在4℃的环境中进行保存。文章将会设置为4组实验，其中第一组为多乐氟（A组），二组为6%生物活性玻璃溶液组（B组），第三组为1%五倍子溶液组（C组），第4组为生物活性玻璃和五倍子的结合溶液组（D组）。
实验需要的仪器有显微硬度计、扫描电子显微镜、生化分析仪、电子天平等。
1.2 实验样本的制作方式
首先将牙冠从生理盐水中拿出备用，将其表面的水分吸干再对牙冠进行处理。实验过程中并不会将整个牙冠使用生物活性玻璃和五倍子，而是在牙齿唇侧釉质的正中央留出一定的面积用来作为实验区域，文章选择的区域大小长宽都为2.5mm，其他面积即为非试验区，为了避免实验过程中超过了实验区域，所以将非试验区使用指甲油进行封闭，当指甲油完全干燥之后，再将处理好的牙齿放到生理盐水中进行保存，即试验样本制作完成。
1.3 脱矿牙样本制作方式
将样本放到四个不同的容器中，然后在每个容器中倒入等量人工脱矿液，浸泡10min之后，使用去离子水对样本进行反复冲洗，目的在于将其表面的人工脱矿液冲洗干净，然后将其吸干水分，最后将其放入到人工唾液中。以这样的一个操作方式，对其经常重复操作，间隔时间为8h每次，一共需要操作20d。在操作过程中，需要对釉质面颜色进行观察。20d之后，将样本使用去离子水进行清洗干净即可。
1.4 再矿化处理
将4组脱矿之后的试样在3个时间点上进行PH循环矿化处理，其时间点分别为早上8点、中午12点和晚上6点。其矿化处理的方式首先将4组样本分别放到各自对应的溶液中浸泡10min，比如B组中将样本放到6%生物活性玻璃溶液中浸泡10min;然后再将试样放到人工脱矿液中进行脱矿20min，再对样本使用去离子水冲洗干净;最后将样本放到37℃的人工唾液中浸泡。该3个步骤即为一个PH循环矿化处理，需要在3个不同时间点循环进行这3个步骤，完成周期为20d。
1.5 再脱矿牙齿处理
将再矿化处理的样本中选择32个，对该32个样本进行再脱矿处理，一共将其平均分为4组。该步骤和脱矿牙样本制作方式一致，只是将其中的周期设置为15d。再脱矿牙齿处理过程中，其中使用的人工脱矿液不需要更换，直至周期时间结束之后，将人工脱矿液分别收集到不同的无菌密闭试管中，然后将其保存到零下80℃的环境中备用，目的在于对其进行生化检测。
1.6 实验说明
（1）荧光显微镜测试实验。首先在脱矿的试样中选择随机选择3个样本，然后再在再矿化处理之后的每组试样中同样随机选择3个样本，然后将每个试样使用罗丹明B溶液进行染色1h，在染色过程中需要避光处理。完成染色之后还需要将每个样本表面的溶液使用去离子水反复进行冲洗，直至将其冲洗干净为止。再将釉质块沿着冠根方向进行切开，最后选择每个样本的相同部位使用显微镜进行观察，主要观察剖面染液渗入情况。
（2）扫描电镜观察。为了观察实验过程中，乳牙釉质表面结构变化，使用扫描电镜对样本进行观察。首先选择脱矿前、脱矿后、再矿化后的样本中随机选择3个样本，并对其进行编号处理。然后依次使用3种不同浓度的乙醇对样本进行梯度脱水处理，3种乙醇的浓度分别为50%、70%和无水乙醇。每种乙醇对样本进行处理时的时间为15min，处理完成之后，将其放到室温环境下进行干燥24h。然后将处理好的试样进行真空喷金，喷金的位置为牙齿的实验区域，最后使用扫描电镜对试验区的釉质表面形态进行观察。
（3）钙离子溶出量的实验检测。使用生化分析仪对30个再脱矿的样本进行检测，主要检测不同组别中人工脱矿液中含有的钙离子浓度。
1.7 统计学分析
选择SPSS19.0软件对实验获得的结果进行分析，正态分布的定量资料使用进行表示，两个因素之间进行比较使用t检验，当P<0.05时表示两者之间的差异有统计学意义。
2 实验结果
2.1 试样荧光显微镜观察结果
使用显微镜对染色的样本进行观察之后，得到如图1所示的结果，从图1（a）中可以看出，其荧光染料沉积多，并且具有比较强的荧光，是因为脱矿之后乳牙的牙釉质变得更加疏松，必然会增加牙齿的孔隙，所以就会造成荧光较多。另外四幅图为再矿化处理之后荧光结果，因为再矿化处理之后，会降低牙釉质的的孔隙，所以相比于图1（a），另外四幅图的荧光强度和宽度都有所降低。从图1（b）中可以看出，荧光带有明显的变窄，但是荧光强度还比较大，图1（c）中的荧光强度有明显降低，而且荧光带缩窄，但是其中可以看出染液渗入部位不均匀，图1（d）中荧光强度比较大，沉积也比较多，而且染液渗入不均匀，图1（e）中荧光强度和宽度，还有其渗入均匀性均比另外几幅图的好，所以能够说明，将五倍子和生物活性玻璃进行融合使用的溶液具有更好的龋齿治疗效果。
2.2 扫描电镜观察结果
使用扫描电镜需要对乳牙脱矿前、脱矿后和再矿化的试样进行观察，主要观察使用不同物质的牙试验区釉质表面结构变化情况。如图2所示为釉质脱矿前的扫描电镜结果，从图中可以看出，乳牙釉质具有光滑的表面，而且大致上没有孔隙，只有个别位置存在很小的釉质划痕。图3为脱矿后的电镜图，当样本经过脱矿处理之后，能够看出牙釉质表面变得更加粗糙，也存在不同大小的孔隙，整体表现出蜂窝孔状。图4为再矿化处理之后4组的扫描电镜图，从中可以看出，再矿化处理之后，样本上存在不同程度的矿物质沉淀，另外每组的表现状态不一样，其中生物活性玻璃溶液組在牙釉质表面能够发现有大块的白色颗粒，呈现出矿化不均、大小不一致的现状，而五倍子溶液组中牙釉质表面存在大小比较接近的颗粒结果物质，且其矿物质沉积不均匀，有些孔隙中没有出现矿物质。而最后一组组合组中，能够看出牙釉质表面呈现出光滑平坦的状态，脱矿之后几乎上没有孔隙出现。
2.3 钙离子溶出量的测量实验
在实验部分，已经对牙齿的再脱矿处理进行分析，保存了每组样本中浸泡牙齿的脱矿液体，于是将对液体中溶出的钙离子浓度进行测定，并进行统计学分析。研究结果如表2所示，其中溶出量后面的字母一致时表示无统计学差异，不同则表示有统计学差异。从表中可以看出，4组试样中钙离子溶出量之间两两进行比较，计算得到，即两组之间具有统计学意义。另外，对比4组试样中钙离子溶出量的大小，发现A>C>B>D，所以将生物活性玻璃和五倍子进行结合使用，有助于降低钙离子溶出量。
3 讨论
龋齿属于一种常见的口腔疾病，尤其是在儿童中，患有龋病的儿童在儿童龋病中发生的概率高达60%以上。这种慢性疾病在初期时，并不会出现任何的症状，所以人们也不会对其进行重视，直至其病情严重之后才进行相应的治疗。儿童患者中的乳牙含钙成分比较低，并且具有不同的晶体结构，所以具有更强的龋齿易感性，所以乳牙患有龋病的概率也在提高，需要对其进行研究，从而使得龋病能够有更好的治疗效果[5-6]。
本实验中选择同一年龄段的儿童乳前牙作为研究样本，这样能够有助于初始变量的控制，而且选择人离体体牙齿作为样本，能够提高实验的真实性，所以最后获得实验结果具有更好的参考价值。另外，实验过程中选择人工脱矿液作为脱矿液，因为其pH值大致在4.5左右，而牙釉质出现脱矿时所需要的pH值不大于4.5，所以正好符合牙脱矿所需要的pH值。在实验过程中，牙齿离开人工脱矿液中之后，需要将其放入到人工唾液中进行保存。在整个实验过程中，虽然在尽量模拟实际口腔情况，但是由于口腔环境比较复杂，其中pH值会存在变动情况，而在实验过程中很难将pH值设定为变动情况，只能将其设置为固定值。
通过使用4组不同的溶液对乳牙釉质早期龋治疗的效果进行研究，文章进行了3种不同实验，分别为荧光显微镜观察、扫描电镜观察和钙离子溶出量测量，实验结果上文也已经得到，然后接下来将对3种结果进行分析。
（1） 荧光显微镜结果分析。荧光染料具有渗透作用，所以将其应用于牙釉质检测中，能够分析出牙釉质的矿物损失量[7]。本文的实验是使用罗丹明B进行染色，使用显微镜进行观察，从观察结果中可以看出，五倍子和生物活性玻璃的融合使用相比于其他几种溶液具有最窄的荧光带和强度最弱的荧光，于是能够反映出该样本经过再矿化处理之后能够非常明显降低脱矿孔隙。
（2）扫描电镜结果分析。在牙齿的脱矿与再矿化结果的变化过程中，使用扫描电镜对其进行观察属于一种主要的观察方式，所以文章同样使用扫描电镜对不同样本的结构变化进行观察。有研究表明，不同浓度的生物活性玻璃溶液具有不同的再矿化效果，且当浓度为6%时，再矿化效果最好，所以文章在进行实验过程中选择的生物活性玻璃溶液浓度为6%。但是对A组中使用扫描电镜进行观察，发现其再矿化效果并不好，矿化不均匀，而且存在大块白色颗粒。出现这种现象大致有两种原因，首先就是其他研究中使用的恒牙作为研究对象，而本文选择乳牙作为研究对象，两种研究对象的晶体结构存在差异，可能会造成研究结果存在差异;然后就是其中过饱和的钙离子多数沉积到了牙釉质表面。
有研究结果表明，不同浓度下五倍子溶液对釉质进行再矿化之间无差异性，其中浓度最低的为1mg/ml，所以本文在实验中选择浓度最低的五倍子溶液进行实验[8]。从文章的实验结果可知，使用五倍子溶液作为釉质再矿化处理的溶液，其再矿化能力比较弱。而通过使用生物活性玻璃和五倍子的溶液之后，能够增强再矿化处理强度，使得釉质变得更加光滑平坦，并且颗粒物质均匀的沉积在牙齿表面。所以通过使用扫描电镜再一次证实了同时使用五倍子和生物活性玻璃溶液更有利于乳牙的再矿化效果。
（3）钙离子溶出量的分析。上面两个实验中能够得到使用生物活性玻璃和五倍子溶液在矿化处理上具有最好的效果。然后文章还对再脱矿进行分析。从结果中可以看出，4组脱矿液中的A组的钙离子浓度大于C组大于B组大于D组，即生物活性玻璃和五倍子溶液组中具有最好的抑制脱矿效果。在4组样本中C组在再矿化方面最低，但是其抑制脱矿的效果优于B组，可能是因为五倍子溶液中的矿物质属于病损深层，所以当再次受到人工脱矿液的侵蚀时会比较困难。所以，通过使用D组樣本更有利于抑制牙齿脱矿，对乳牙的龋治疗效果将会更好。
4 结语
乳牙容易发生龋病，需要对其进行重视和及时治疗，对早期龋病进行治疗，其效果将会更好。文章分析多乐氟、生物活性玻璃溶液、五倍子溶液及生物活性玻璃和五倍子结合溶液这4组对乳牙龋齿治疗进行实验，从结果中可以看出两者的结合溶液具有更好的再矿化效果和抑制牙齿脱矿作用，所以将其应用于乳牙釉质早期龋齿治疗中具有不错的临床效果。
参考文献
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