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高效液相操作心得

2021-10-22 10:28:18心得体会
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高效液相操作心得 本文简介:高效液相操作心得我就自己在做实验过程中所掌握的东西归纳如下,希望对各位同学有帮助操作过程:1、开机操作:(1)、打开电源(2)、自上而下打开个组件电源,BootpServer里显示有信号时,打开工作站,先打开在线工作站;打开离线状态的工作站可以离线处理图谱与出报告(3)、打开冲洗泵头的10%异丙醇溶

高效液相操作心得 本文内容:

高效液相操作心得

我就自己在做实验过程中所掌握的东西归纳如下,希望对各位同学有帮助

操作过程:

1、

开机操作:

(1)、打开电源

(2)、自上而下打开个组件电源,Bootp

Server里显示有信号时,打开工作站,先打开在线工作站;打开离线状态的工作站可以离线处理图谱与出报告

(3)、打开冲洗泵头的10%异丙醇溶液的开关(需用针捅抽),控制流量大小,以能流出的最小流量为准;提到异丙醇溶液,我还学到一点就是,在用完反相后要换成正相时,我们需要用异丙醇过度30分钟左右,然后在换上正相柱

(4)、注意各流动相所剩溶液的容积设定,若设定的容积低于最低限会自动停泵,注意洗泵溶液的体积,及时加液;

(5)、使用过程中要经常观察仪器工作状态,及时正确处理各种突发事件。

2、

先以所用流动相冲洗系统一定时间,如所用流动相为含盐流动相,必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相,正式进样分析前30min

左右开启D灯或W灯,以延长灯的使用寿命;

3、

建立色谱操作方法,注意保存为自己清楚的方法名,勿覆盖或删除他人的方法及实验结果;

4、

使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒,洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;

5、

溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤;

6、

实验结束后,如果有盐一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上,再用甲醇冲洗。如果是一般的溶剂系统就直接用甲醇冲洗,冲洗过程中关闭D灯、W灯;以延长灯的寿命

7、

关机时,先关闭泵、检测器等,再关闭工作站,然后关机,最后自下而上关闭色谱仪各组件,关闭洗泵溶液的开关;

8、

使用者须认真履行仪器使用登记制度,出现问题及时向老师报告,不要擅自拆卸仪器。未经操作培训,不得擅自使用仪器。

流动相:

1、

流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围;

2、

水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质;

3、

使用双泵时,最好不要有机相与水相直接调用,这样可能造成管路气泡,最好我们根据自己的需要配制一定浓度的有机相与水相的混合溶液,再与水相混合调用

4、换流动相后,要purge

样品:

1、

采用过滤或离心方法处理样品,确保样品中不含固体颗粒;

2、

用流动相或比流动相弱的溶剂制备样品溶液,若为反相柱,则极性比流动相大;若为正相柱,则极性比流动相小,尽量用流动相制备样品液;

手动进样时,进样量尽量小,使用定量管定量时,进样体积应为定量管的3~5倍;

色谱柱:

1、

使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书,注意适用范围,如pH值范围、流动相类型等;2、

使用符合要求的流动相;

3、

使用保护柱;

4、

如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗。

5、

色谱柱在不使用时,应用甲醇或乙氰冲洗,取下后紧密封闭两端保存;

6、

不要高压冲洗柱子;

7、

不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱,使用硅胶柱时还要特别小心流动相的PH范围在2~8之间;使用过程中注意轻拿轻放。

8、上柱时我们要注意柱子的方向,千万不要装反了

可能水平不太高,希望对你有点点帮助啊

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