松树线虫病疫木生物除害技术要点
1松材线虫病危害
松材线虫属于线虫动物门、线虫纲、滑刃目、滑刃科、伞滑刃属，是中国危害较大的外来入侵物种之一。松材线虫寄生在松树上，会使得松树由上而下变黄，最终整棵松树枯死，松材线虫病有“松树癌症”之称，会对松树林造成毁灭性的伤害。据了解，松材线虫病自1982年在中国首次发现以来，在中国快速扩散并造成了巨大危害。目前已扩散至全国19个省（区、市）、726个县级行政区、5 479个乡镇级行政区。已直接致死松树8 000多万株，仅2019年病死松树数量就达1 946.74万株，经济损失可达上千亿元。
2防治措施及弊端
现阶段，松材线虫病防治工作仍有较大的进步空间。首先，传统的松树线虫病防治方法不科学；
其次，防治宣传工作不到位，导致林农对病虫防治工作认识不到位，影响了防治工作效率；
再次，检测工作不到位，难以全面推进；
最后，部分防治工作人员专业能力较差，无法正确处理松材线虫病疫木。
3生物防治进展及优点
近年来，学者们开始探究用生物防治方法来防治松材线虫，其中包括植物内生菌防治松材线虫的方法。生物防治技术对环境、动植物及人类的影响较小，可以达到无毒状态，保护生态环境，防治效果理想。另外，生物防治技术还可保护害虫天敌，实现长时间控制的要求。
4植物内生菌的应用
现阶段，植物内生菌已有广泛应用。有研究表明内生菌Esteya Vermincola对松材线虫有着侵染活性，在野外实验中，内生菌Esteya Ver‐mincola完全可以延缓松材线虫病，一定程度上保护松树，内生菌Esteya Vermincola还可以有效减少松墨天牛传播松材线虫的数量，且树干注射Esteya Vermincola真菌的防治效果优于阿维菌素。实验证明，植物内生菌对松材线虫治疗效果较好。
5实验目的与意义
传统的防治策略主要为切断传播途径，例如使用松墨天牛诱捕器直接消灭松材线虫或使用阿维菌素注干剂，将化学防治、物理防治和生物防治相结合。但化学防治措施如阿维菌素在使用后会在松树内产生残留。近年来，对松材线虫及植物内寄生菌之间的相互作用的研究越来越多，可彻底根治松材线虫。在喷洒该菌剂后，可以促进植物内生菌与根际微生物的生长，保护松树，治疗松材线虫。该菌剂在实验室中已经取得良好的效果，可以治愈患病不严重的马尾松。本次实验研究在野外环境下该种菌剂的防治效果。
6实验材料与方法
6.1菌剂来源
某公司正在进行试验的产品。
6.2实验地点
环江毛南族自治县某松树林。为减少地形、光照、土壤、物种丰富度、年龄结构、人为因素等对实验结果的影响，选取两片生长状况相似、距离较近且同一年造林的松树纯林，期间不进行任何的抚育间伐，统一在11月进行病树抚育。
6.3实验准备
在实验开始前，将样地内的所有松树全部钉上号码牌。方便实验记录。号码牌中C代表对照区，T代表处理区，数字代表序号，如T-53为处理区的第53棵树。
6.4实验内容与方法
6.4.1处理区与对照区线虫量测定
实验时间为2021年5月，并未发现有明显被松材线虫感染的松树，但是林中存在已经枯死的树木，还不能确定该片是否存在松材线虫，在实验区和对照区各选取3棵发黄面积较多的树木，并取发黄部分的枝条，分开装好，用漏斗法测定该区域是否有线虫。
6.4.2土壤取样方法与菌剂喷洒方案
先在处理区与对照区随机各选取5个地点，取500 g左右土壤，去除表层土壤，取大约5～15 cm深度的土壤带回实验室分析。将微生物菌剂1：10稀释，装入水桶中，使用高压水枪对实验区进行喷洒，尽量喷洒均匀。3个月后重新在处理区与对照区随机各选取5个位置取样，再进行第2次微生物菌剂的喷洒。第2次取样3个月后，再次使用同样的方法取样。
6.4.3微生物群落组成分析
为确定环境中微生物情况，通过单样本多样性即alpha多样性反映微生物群落的丰富度和多样性，根据统计学原理估计环境群落的物种丰富度和多样性，可以得知一个或多个样本在各分类水平上的分类学比对情况。
7结果与分析
7.1处理区对照区线虫量
该区域确实存在松材线虫感染，但是该区域内的松材线虫分布不均，还有一小部分林木可能没有被松材线虫感染，见表1。
7.2松树健康状况对比
7.2.1样地内新增马尾松株数
分别计算处理区与对照区每月每公顷新增的发黄松树。利用SPSS软件进行样本T检验，其中P<0.05说明处理区与对照区新增发黄马尾松的数量差异显著，处理区的马尾松新增数量明显少于对照区的新增数量，见表2与表3。
7.2.2馬尾松健康状况
对选定马尾松发黄松针所占所有松针的比例进行记录，对马尾松在该月份下发黄松针所占健康松针的比例估值。对比估计出的松树中发黄松针占全树松针的比例，对照区中选择的马尾松整体趋势向全树变黄发展，其中出现4棵死树，而处理区中选中的马尾松整体向无变黄松针发展，原来发黄率不高的松针在10月痊愈。在对照区马尾松上发现发黄松针树枝枯死，但未扩散到全树，采取它的部分树枝用漏斗法进行松材线虫检验，发现该树体内没有松材线虫，枝条变黄为自然修枝现象，对实验结果无影响。
7.2.3 11月抚育间伐数量
最终在11月进行抚育间伐时，在处理区砍伐松树8棵，在对照区砍伐松树23棵，对照区砍伐的死树量明显多于处理区。
8讨论与结论
该菌剂在野外对土壤根际微生物有明显影响，Rhodoplanes（红游动菌属）与Mycobaterium（分枝杆菌属）2种微生物在3次检测中均差异显著，其他土壤微生物在菌剂喷洒后变化较大，差异显著，证明该菌剂可以改变土壤根际微生物群落，但其他菌种没有明显重复，还需进一步实验。实验组数偏少，虽然每1组样本量较大，但在死树砍伐数量方面缺少数据对比，可能导致实验误差。在未来研究中，可多设置处理与对照实验。由于当地林业局通常投放花绒寄甲与松树注干剂防治松材线虫病，所以在判断松树健康状况时会有一定影响。尽量寻找没有治理但松材线虫病疫情较为严重的松林，保证研究结果。
（广西壮族自治区环江毛南族自治县林业局谭会纯）89607ED4-C2A3-4E94-AC5E-E1BE96794BD2
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